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實驗研究泡沫真空冷凍干燥

點擊次數(shù):1802    更新時間:2017-01-03

實驗研究泡沫真空冷凍干燥

本文對泡沫冷凍干燥保護劑的配方及過程參數(shù)進行了四因素三水平的正交實驗研究,確定了各因素對發(fā)泡效果影響的顯著性。其中發(fā)泡真空度對發(fā)泡高度的影響zui顯著,明膠及Pluronic-F68 用量其次,擱板溫度的影響zui不顯著。應(yīng)用發(fā)泡效果*的配方及過程參數(shù),進行了1 ml 樣品的泡沫真空冷凍干燥實驗,一次干燥時間3 h、二次干燥時間12 h,所得樣品剩余含水量小于2.0%。

  冷凍干燥是生物制藥、食品和化妝品生產(chǎn)以及超細粉體生產(chǎn)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的技術(shù)之一。由于其制品具有保存期限長、使用方便、便于運輸、可常溫保存等優(yōu)點,在疫苗、微生物的保存中冷凍干燥方法也經(jīng)常被運用。與其它常見干燥方法如烘干法相比,凍干生產(chǎn)的周期長,能耗大,這些缺點制約了凍干技術(shù)的應(yīng)用范圍。

  為提高凍干生產(chǎn)的效率、減少其能耗同時又能保持其制品的優(yōu)點,近年來有國外學(xué)者針對獸用疫苗提出了一種新的干燥方法,泡沫真空冷凍干燥,其特點是:對物料進行前期預(yù)處理,載入發(fā)泡劑,配合抽真空等手段使物料膨松成泡沫狀,然后在真空下加熱完成一、二次干燥,從而除去物料中的水分。新方法由于發(fā)泡后物料的比表面積顯著增大,傳熱、傳質(zhì)情況能得到明顯改善,從而極大地提高了干燥速率。運用此方法,國外學(xué)者已干燥保存了流感病毒、支原體、牛瘟病毒等,取得了良好的實驗效果,還有學(xué)者嘗試采用此方法干燥食品。

  國內(nèi)目前關(guān)于泡沫真空冷凍干燥研究的公開報道還很少見。為了促進泡沫真空冷凍干燥技術(shù)在我國的應(yīng)用和推廣,本文擬對泡沫真空冷凍干燥工藝開展實驗研究,確定影響發(fā)泡效果的主要因素,并以發(fā)泡效果*的工藝參數(shù)進行瓶裝1ml樣品的泡沫真空冷凍干燥。

1、材料和方法

  1.1、實驗材料

  本文實驗采用的泡沫真空冷凍干燥配方包含40%蔗糖、2%精氨酸、1%甘油、0.025 mol·L-1磷酸鹽緩沖液(pH 7.2)以及一定比例的Pluronic-F68、明膠,預(yù)期用于雞新城疫活疫苗的保存。其中Pluronic F-68 作為發(fā)泡劑,在系統(tǒng)抽真空時使溶液膨松成泡沫狀;明膠作為穩(wěn)定劑,使產(chǎn)生的泡沫結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。

  1.2、實驗裝置

  所使用的冷凍干燥裝置簡圖如圖1 所示。擱板下面布置有電加熱器,其功率輸出由PLC 控制,從而控制擱板的溫度。制冷系統(tǒng)采用單級蒸汽壓縮式,混合制冷工質(zhì)在壓縮機內(nèi)被壓縮成高溫高壓的蒸汽后進入冷凝器中,冷凝后的低溫低壓流體分為兩路,分別在兩個手動節(jié)流閥中進行節(jié)流、調(diào)節(jié)流量,隨后兩股流體分別進入凍干箱中的擱板和冷阱盤管中進行制冷,完成一個制冷循環(huán),實驗時冷阱溫度約為-60 ℃。真空泵為三相供電,接在西門子MICROMASTTER440 變頻器的輸出端,通過控制真空泵的抽速,配合真空微調(diào)閥開度調(diào)整,達到控制干燥箱真空度的目的。使用Agilent 數(shù)據(jù)采集儀每6 秒鐘采集一次樣品內(nèi)部溫度數(shù)據(jù)。樣品在擱板上預(yù)冷后開始抽真空發(fā)泡,由于抽真空速率過快會引起溶液噴瓶,同時也為了得到更好的發(fā)泡效果,發(fā)泡過程需分階段進行,先使干燥箱內(nèi)達到一定的真空度,保持兩分鐘后將真空控制在10 Pa以內(nèi)。

1.3、實驗方案

  泡沫真空冷凍干燥過程如下:預(yù)冷→發(fā)泡→凍結(jié)→一次干燥→二次干燥→密封。實驗包括兩部分,*部分通過設(shè)計正交實驗確定影響發(fā)泡效果的因素,第二部分在*部分基礎(chǔ)上進行,以*發(fā)泡效果對應(yīng)的工藝條件進行1 ml 樣品的泡沫冷凍干燥。通過文獻調(diào)研及初步實驗,作者確定了Pluronic F-68 以及明膠的含量、擱板溫度、真空度等四個會影響發(fā)泡效果的因素。因素水平范圍如表1 所示,正交實驗表按L9 (34)安排。每個實驗重復(fù)三次。發(fā)泡效果的指標為發(fā)泡高度和一次干燥時間,發(fā)泡高度越高、一次干燥時間越短,說明所選取的工藝條件越佳。第二部分實驗的步驟如下:1)取1 mL 樣品溶液裝在Φ22 mm西林瓶里,裝液高度約2.5 mm,半蓋上瓶塞,放置于擱板上,預(yù)冷30 min;2)抽真空發(fā)泡;3)一次干燥3 h;4) 擱板溫度升溫至32 ℃進行二次干燥,時間12 h;5)樣品的剩余含水量測定采用烘干稱重法,電子天平采用梅特勒- 托利多的AL104型,精度為0.1 mg,實驗重復(fù)三次。

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