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一些保護劑在蛋白和多肽的凍干制劑中的應(yīng)用

點擊次數(shù):3981    更新時間:2016-08-12

   一些保護劑在蛋白和多肽的凍干制劑中的應(yīng)用,例如甘露醇是一種多羥基化合物,不僅可作為優(yōu)良的骨架劑使用,也能兼作滲透性調(diào)節(jié)劑及蛋白質(zhì)的凍干保護劑。

   氨基酸也是一種常見的蛋白質(zhì)保護劑,研究發(fā)現(xiàn),兩種低濃度的氨基酸(谷氨酸和精氨酸)對PEG—rhlFNot2b的凍干保護作用非常顯著,可能是因為:①二者一個是酸陛氨基酸,一個是堿性氨基酸,加人后使制劑具有了更好的緩沖能力,提高了蛋白質(zhì)在凍干過程中的穩(wěn)定性;②氨基酸的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度相對高于非氨基酸緩沖劑,因此可能對凍干制劑的穩(wěn)定性起到了一定作用;③ 氨基酸的另一種可能的保護機制是在冷凍過程中與蛋白共濃縮,從而起到了稀釋和保護蛋白的作用;④在冷凍和凍干過程中,兩性的氨基酸分子與蛋白分子之間發(fā)生特異的相互作用,保護蛋白不變性。

    糖是zui常見、使用zui廣泛的一類凍干保護劑,是蛋白質(zhì)的非特異性穩(wěn)定劑,在凍干機?干燥的各個階段均能對蛋白質(zhì)起到一定的保護作用。蔗糖和海藻糖都是二糖,其中蔗糖化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,多呈無定型結(jié)構(gòu),對阻止蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)改變以及凍干過程中及儲存期內(nèi)蛋白質(zhì)的伸展和聚集起顯著作用。蔗糖也有一個相對較高的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度,使其在冷凍狀態(tài)下與蛋白質(zhì)共濃縮,起到了稀釋蛋白質(zhì)的作用,從而防止了聚合,并且維持蛋白分子的結(jié)構(gòu)。另外蔗糖、海藻糖以及甘露醇上的羥基能替代部分結(jié)構(gòu)水,與蛋白中的羰基和氨基結(jié)合形成的氫鍵使其在缺水的條件下仍能保持原有結(jié)構(gòu),而不喪失活性。蔗糖具有比其他多元醇更*的水置換特性。海藻糖的作用與蔗糖相似,但比蔗糖具有更高的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度和更低的引濕性,且更不具有還原性。 

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